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液相色譜儀分析中保留時間不重現(xiàn)的可能原因:
1
確認(rèn)流動相是否新鮮配制的,比例有無錯誤。
2
確認(rèn)色譜條件是否在色譜柱使用范圍內(nèi),如pH范圍、溫度和壓力。
3
仔細(xì)觀察柱前壓的變化。如果壓力穩(wěn)定,可以判斷泵系統(tǒng)沒有問題。如果壓力不穩(wěn)定,通常是由于泵內(nèi)有氣泡造成的,一定會影響保留時間。將流動相仔細(xì)脫氣,并排出泵內(nèi)氣泡。
4
觀察色譜峰形和柱效變化情況,確認(rèn)色譜柱是否被污染。如果色譜柱被污染,可使用適當(dāng)溶劑沖洗。
5
如果同時伴有色譜柱柱壓升高,降低柱壓。
6
如果使用梯度洗脫,確認(rèn)平衡時間是否足夠長。流動相中使用離子對試劑(烷基磺酸鈉等)或固定相為正相硅膠等往往需要更長的平衡時間。
7
確認(rèn)樣品是否過載。
8
組分在色譜柱中保留不夠。調(diào)整色譜條件,使樣品在柱上適當(dāng)保留。